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如何正确使用生物化学检测试剂盒?
更新时间:2022-10-20
技术文章
生物化学检测试剂盒
应用领域广泛,涉及酶类、氧化应激、铁死亡、肝功能、肾功能、氨基酸蛋白、糖酵解、无机盐离子、脂质代谢、植物抗逆性等。检测样本类型丰富,涉及多种体液、组织、细胞、食品、植物、药物、化妆品等。主要的检测仪器为酶标仪,分光光度计和荧光酶标仪。
在做生物化学检测试剂盒实验时洗涤很重要:
洗涤步骤看似很简单无聊,其实很重要,因为如果未结合的材料(如非特异结合的抗体或检测试剂)残留在微孔板中,就会增加背景噪音。如有必要,可增加洗涤液中的盐浓度,这会阻止非特异结合反应。如果背景过高,ELISA试剂盒怀疑洗涤不够,可以尝试增加洗涤次数。
对于科研人员来说小鼠ELISA试剂盒原理和操作步骤并不陌生,不外乎固定抗原,添加一抗、二抗和底物,操作过程中夹杂着洗涤和封闭步骤。然而,即使是平淡无奇的洗涤和封闭,如果操作不合理,也会很大程度上影响实验的准确度。实验结束时我们是否能获得有意义而且准确的信息,这在很大程度上取决于操作结果的正确与否。
生物化学检测试剂盒的使用方法:
1、血清:操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血红细胞迅速小心地分离。
2、血浆:EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3、细胞上清液:1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4、组织匀浆:将组织加入适量盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液。
5、保存:如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
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