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关于生物化学检测试剂盒的反应原理你了解吗?
更新时间:2022-04-21
技术文章
生物化学检测试剂盒
采用微生物方法,在微孔板种定量检测食品、药品和饲料中的生物素总量(包括添加和原生生物素)。所有所需的试剂均包含在试剂盒中。本试剂盒共能提供96次检测(包括标准品)。使用ELISA reader (610 - 630 nm 或者540 - 550 nm)进行读数。
生物化学检测试剂盒的反应原理:
对于延迟区来讲,无规律可寻,对于指标检测没有意义。
等速区对应的指标检测方法是速率法。速率法又称连续监测法,是在测定酶活性或用酶法测定代谢产物时,连续选取时间-吸光度曲线中线性期内4个以上测光点作为读数点,并以单位时间吸光度变化值计算结果。线性期就是此期间内各测光点之间的吸光度差值相等,此线性期对酶促反应的底物来说属于零级反应。其测光点一般设置在加入启动因子并孵育一段时间后开始,持续1-3min,一般应用于酶类项目,可以使用因数法来计算待测浓度。
过渡区对应是固定时间法,是终点法中存在一种特殊情况,指在时间-吸光度曲线上选择两个读数点,此两点既非反应初始吸光度亦非平衡点吸光度,这两点的吸光度差值用于结果计算。目的是解决某些化学反应的非特异性问题,提高准确度。
平衡区对应的是终点法,按测光点的个数分为:一点终点法、两点终点法。
一点终点法是指在反应到达平衡点,即在时间-吸光度曲线上吸光度不再改变时,选择一个测光点计算待测物质浓度。
两点终点法常应用于双试剂的测定项目中,多数一试剂通常只含缓冲液等成分,它与样本一般不起特异性反应;因此在二试剂加入前,选择一个测光点作为一读数点,此时的吸光度相当于样品空白。加入二试剂后待测物质起反应,并经过一定时间反应到达平衡点,此时选择二个读数点,两读数点吸光度之差用于计算待测物质浓度。
两点法能有效消除样品溶血、黄疸、脂浊等造成的光吸收干扰。如:酶法测定葡萄糖、总胆固醇、甘油三酯、尿酸、肌酐,以及化学法测定总蛋白、总胆红素、直接胆红素、钙、磷、镁、铁等;并且都能在加入二试剂后的2-5 min内达到反应终点。
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